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猪瘟光学检测原理
养殖场规模养殖生猪,担心的恐怕就是猪瘟疫病。一旦出现这种情况,意味着重大财产损失。因此规模养殖场必须配备相应的检测手段,监控生猪日常生长情况。目前国内主要的猪瘟光学检测原理,大致可以如下分为几种:
1.实时荧光定量QPCR:针对猪瘟病毒(CSFV/ASFV)保守基因设计引物与荧光探针(如 FAM、HEX、CY5);当PCR 扩增时,探针水解从而释放荧光,通过QPCR仪器实时监测荧光强度,判定结果是否阳性。
2. 荧光免疫检测(FAT/IFA):利用荧光标记抗体与样本中病毒抗原结合;通过激发光照射产生特异性荧光,在经过显微镜 /分析仪判读数值是否阳性。
3.胶体金免疫层析:金标抗体与样本抗原结合,在检测线形成显色条带;金标读数仪通过反射/吸收光强度进行定量。在胶体金免疫层析光路结构中激发与检测光路成一定角度(如 45°),减少直射光干扰。通过采用窄带滤光片过滤杂散光提高信噪比和检测准确度。
猪瘟荧光检测光路结构
1.光源LED / 氙灯发出宽谱光 → 激发滤光片过滤出特定波长(如 470nm)。二向色镜反射激发光至样本,并且透射样本发射的荧光(如520nm)。发射滤光片滤除杂光 → PMT/CCD/PD 采集荧光信号 。
2.滤光片类型: a.激发滤光片(Excitation Filter) b.二向色镜(Dichroic Mirror) c.发射滤光片(Emission Filter)
激发和发射滤光片通用技术指标参考:中心波长(CWL)、半高宽(FWHM)、透过率(T%)、截止深度(OD)。
猪瘟ELISA 抗体间接法检测光路结构
结构:光源(卤素灯/白光LED)→准直透镜(平行光)→滤光片轮(选择波长)→微孔板/样本→聚光透镜→光电探测器(PD/PMT)
猪瘟光学检测滤光片选型步骤
a.匹配机型:先确认滤光轮孔位尺寸,选择适合对应机型的滤光片。
b.Elisa波长选择: 450、630 nm;其他波长可以选配。
c.荧光激发和发射滤光片:FAM/SYBR Green BP470/BP520 ;HEX/VIC BP535/BP560 ;ROX BP580/BP610等
d.尺寸可定制,包括Dia10mm,Dia12mm,Dia12.7mm,Dia15mm等。